雖(sui)然PCR儀器不(bu)是(shi)壹(yi)種(zhong)計量儀器,但(dan)其主(zhu)要作(zuo)用(yong)原(yuan)理與基本(ben)計量要素密(mi)切(qie)相(xiang)關(guan),要求(qiu)較高(gao),壹(yi)旦失控(kong),儀器將不(bu)能(neng)正(zheng)常(chang)工(gong)作(zuo),所以PCR儀器也(ye)需要定(ding)期(qi)檢測和(he)維護(hu),這對(dui)依(yi)賴自然(ran)風降溫(wen)的PCR儀器尤為(wei)重(zhong)要。
在儀器的維護(hu)保養(yang)中,需要註(zhu)意以(yi)下(xia)問(wen)題(ti):
1)PCR儀器需要定(ding)期(qi)檢測,視(shi)制冷(leng)方(fang)式而定(ding)壹(yi)般半(ban)年至(zhi)少(shao)壹(yi)次。
2)PCR反應的要求(qiu)溫(wen)度與實際分(fen)布(bu)的反應溫(wen)度是不(bu)壹(yi)致的,當檢測發(fa)現各(ge)孔平均溫(wen)度差偏離設(she)置溫(wen)度大於(yu)1~2℃時(shi),可(ke)以(yi)運(yun)用(yong)溫(wen)度修正(zheng)法糾(jiu)正(zheng)PCR實際反應溫(wen)度差。
3)PCR反應過(guo)程(cheng)的關(guan)鍵(jian)是(shi)升(sheng)、降溫(wen)過(guo)程(cheng)的時(shi)間(jian)控(kong)制,要求(qiu)越短越好(hao),當PCR儀的降溫(wen)過(guo)程(cheng)超過(guo)60s,就(jiu)應該(gai)檢查(zha)儀器的制冷(leng)系(xi)統,對(dui)風冷制(zhi)冷的PCR儀要較(jiao)*地清(qing)理反應底座(zuo)的灰塵;對(dui)其他(ta)制(zhi)冷(leng)系統應(ying)檢查(zha)相關(guan)的制冷(leng)部(bu)件。
4)壹(yi)般情(qing)況(kuang)如(ru)能(neng)采(cai)用(yong)溫(wen)度修正(zheng)法糾(jiu)正(zheng)儀器的溫(wen)度時(shi),不(bu)要輕(qing)易打開(kai)或(huo)調整(zheng)儀器的電子控(kong)制部件,必要時(shi)要請專(zhuan)業(ye)人(ren)員修(xiu)理或(huo)利用(yong)儀器電子線路(lu)詳細圖(tu)紙進(jin)行維修。
下(xia)面(mian)介(jie)紹壹(yi)些具(ju)體的保養(yang)維護(hu)方(fang)法:
1.樣(yang)品池(chi)的清(qing)洗
先(xian)打開(kai)蓋(gai)子,然(ran)後(hou)用(yong)95%乙(yi)醇或(huo)10%清(qing)洗液浸泡樣品池(chi)5min,然(ran)後(hou)清(qing)洗被汙染(ran)的孔;用(yong)微量移液器(qi)吸(xi)取(qu)液體(ti),用(yong)棉簽(qian)吸(xi)幹(gan)剩余液體(ti);打開(kai)PCR儀,設定(ding)保(bao)持(chi)溫(wen)度為(wei)50℃的PCR程(cheng)序並(bing)使(shi)之(zhi)運行,讓(rang)殘(can)余液體(ti)揮發(fa)去除。壹(yi)般5~10min即(ji)可(ke)。
2.熱(re)蓋(gai)的清(qing)洗
對(dui)於(yu)熒光(guang)定(ding)量PCR儀,當有熒光(guang)汙染(ran)出(chu)現(xian),而(er)且(qie)這(zhe)壹(yi)汙染(ran)並(bing)非(fei)來(lai)自(zi)樣(yang)品池(chi)時(shi),或(huo)當有(you)汙染(ran)或(huo)殘(can)跡物(wu)影(ying)響到(dao)熱蓋(gai)的松(song)緊(jin)時(shi),需要用(yong)壓(ya)縮空氣(qi)或(huo)純(chun)水清(qing)洗墊蓋(gai)底面(mian),確保(bao)樣品池(chi)的孔幹(gan)凈(jing),無(wu)汙(wu)物(wu)阻擋(dang)光(guang)路(lu)。
3.儀器外表(biao)面的清(qing)洗
清(qing)洗儀器的外表(biao)面(mian)可以除去(qu)灰塵和(he)油脂(zhi),但(dan)達(da)不(bu)到(dao)消(xiao)毒(du)的效果(guo)。選擇沒有(you)腐(fu)蝕(shi)性(xing)的清(qing)洗劑(ji)對(dui)PCR儀的外表(biao)面(mian)進行清(qing)洗。
4.更(geng)換(huan)保(bao)險絲(si)
先將PCR儀關(guan)機,拔(ba)去(qu)插(cha)頭(tou),打開(kai)電源(yuan)插(cha)口(kou)旁邊(bian)的保險盒(he),換(huan)上(shang)備用(yong)的保險絲(si),觀(guan)察是否恢復正常(chang)。