實(shi)時定量PCR儀(yi)通過(guo)熒(ying)光(guang)化學(xue)物質(zhi)(如(ru)熒(ying)光(guang)染(ran)料(liao)或熒(ying)光(guang)探針(zhen))標記(ji)DNA產(chan)物,在PCR指(zhi)數擴增(zeng)期(qi)實時捕獲(huo)熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)強(qiang)度(du)變(bian)化。系統(tong)自(zi)動(dong)采(cai)集每(mei)個循(xun)環(huan)的(de)熒(ying)光(guang)增(zeng)量數據(ju),經配套(tao)軟件進行(xing)基(ji)線校正(zheng)和閾值(zhi)設定後(hou),利(li)用(yong)標準(zhun)曲(qu)線或ΔΔCt法計(ji)算(suan)初(chu)始(shi)模板(ban)濃度(du)。這(zhe)壹技(ji)術實現(xian)了(le)PCR從定性到定(ding)量的飛躍,且(qie)整(zheng)個PCR過程可實現(xian)自動(dong)化,耗(hao)時短(duan),操作(zuo)方便,不(bu)易(yi)汙染(ran)。
實時(shi)定量PCR儀(yi)選(xuan)型(xing)建(jian)議(yi):
在選擇(ze)實(shi)時定(ding)量PCR儀(yi)時(shi),需(xu)綜(zong)合(he)考(kao)慮以下(xia)因素(su):
實驗(yan)需(xu)求(qiu):明(ming)確待(dai)檢測的靶標分子類型、檢測靈敏度(du)要(yao)求及(ji)平(ping)臺(tai)適用範(fan)圍。例如(ru),基(ji)因表(biao)達(da)分析可選擇(ze)4通道(dao)系統(tong),而(er)病毒載(zai)量檢測則建議選(xuan)配(pei)ROX校正(zheng)染(ran)料(liao)通道(dao)。
性能(neng)指(zhi)標:關(guan)註(zhu)溫控系統(tong)的(de)精(jing)度(du)、靈敏度(du)、擴增(zeng)速(su)度(du)及(ji)均勻性。性能(neng)越好(hao)的PCR儀(yi),實(shi)驗(yan)穩(wen)定(ding)性和(he)準(zhun)確(que)性越高。
品(pin)牌和售(shou)後(hou)服務:選(xuan)擇(ze)品(pin)牌的產(chan)品(pin),確(que)保(bao)產(chan)品(pin)質(zhi)量和售(shou)後(hou)服務可靠(kao)。同時,考(kao)慮品(pin)牌產(chan)品(pin)的(de)應(ying)用(yong)範(fan)圍和(he)配(pei)件選擇(ze)。
預(yu)算(suan):根(gen)據預(yu)算(suan)選(xuan)擇(ze)適(shi)合的(de)儀(yi)器。在預(yu)算(suan)有(you)限的情況下(xia),可選擇(ze)性能(neng)穩(wen)定(ding)、性價(jia)比(bi)較(jiao)高的(de)PCR儀(yi)。