人(ren)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)是固相(xiang)夾(jia)心(xin)法(fa)酶(mei)聯免(mian)疫吸(xi)附實(shi)驗(yan)(ELISA).ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)已知(zhi)濃度的標(biao)準品(pin)、未知(zhi)濃度的樣(yang)品加(jia)入微(wei)孔酶(mei)標(biao)板(ban)內(nei)進(jin)行(xing)檢測。先將(jiang)生物(wu)素標(biao)記(ji)的抗體同(tong)時(shi)溫育。洗滌(di)後(hou),加入親(qin)和素標(biao)記(ji)過的(de)HRP。再經(jing)過溫育和洗滌(di),去除未(wei)結合(he)的酶(mei)結合(he)物(wu),然(ran)後(hou)加入底(di)物(wu)A、B,和酶(mei)結合(he)物(wu)同(tong)時(shi)作(zuo)用。產生顏色(se)。ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)顏色的深(shen)淺(qian)和樣(yang)品中的(de)濃(nong)度呈(cheng)比(bi)例關系(xi)。人(ren)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)有(you)三(san)個(ge)必要的試(shi)劑(ji):免(mian)疫吸(xi)附劑(ji)、結合(he)物(wu)和酶(mei)的底(di)物(wu)。
人(ren)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)的結構組成:
1、血(xue)清:操作過程(cheng)中避(bi)免(mian)任(ren)何細(xi)胞(bao)刺激(ji)。使(shi)用不含(han)熱原(yuan)和內(nei)毒(du)素的試(shi)管(guan)。收(shou)集(ji)血(xue)液(ye)後(hou),1000×g離(li)心(xin)10分鐘將血(xue)紅細胞(bao)迅(xun)速小心地(di)分離(li)。
2、血(xue)漿(jiang):EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽、肝(gan)素血漿(jiang)可(ke)用於檢測。1000×g離(li)心(xin)30分鐘去除顆(ke)粒。
3、細胞(bao)上(shang)清液(ye):1000×g離(li)心(xin)10分鐘去除顆(ke)粒和聚合(he)物(wu)。
4、組織(zhi)勻(yun)漿(jiang):將(jiang)組織(zhi)加入適量生理鹽水(shui)搗碎(sui)。1000×g離(li)心(xin)10分鐘,取(qu)上(shang)清液(ye)。
5、保(bao)存:如(ru)果(guo)樣(yang)品不(bu)立(li)即使(shi)用,應(ying)將(jiang)其(qi)分成小部分(fen)-70℃保(bao)存,避免(mian)反復冷(leng)凍(dong)。盡可能(neng)的不(bu)要使(shi)用溶血或(huo)高血脂(zhi)血。如(ru)果(guo)血清中大(da)量(liang)顆粒,檢測前先離(li)心(xin)或(huo)過濾(lv)。不要在37℃或(huo)更(geng)高的溫度加熱解(jie)凍(dong)。應(ying)在(zai)室溫下(xia)解(jie)凍(dong)並(bing)確保(bao)樣(yang)品均(jun)勻(yun)地充分解(jie)凍(dong)。