細(xi)胞(bao)株(zhu)是原(yuan)代培養的(de)細(xi)胞(bao)壹(yi)般傳(chuan)至10代左(zuo)右就(jiu)不容易(yi)傳(chuan)下去(qu)了,但(dan)有(you)少(shao)數(shu)細(xi)胞(bao)可(ke)以渡(du)過危機存(cun)括(kuo)下來(lai),這(zhe)些存(cun)活的(de)細(xi)胞(bao)又可(ke)以順利傳40壹(yi)50次(ci),而(er)且依然(ran)保持(chi)原(yuan)來(lai)的(de)染色(se)體(ti)數(shu)目以及(ji)接(jie)觸抑制的(de)行(xing)為(wei)。細(xi)胞(bao)株(zhu)是冷(leng)凍保存(cun)的(de)細(xi)胞(bao),作為細(xi)胞(bao)培(pei)養基礎的(de)細(xi)胞(bao),主要用於研(yan)究目的(de)。到目前(qian)為止(zhi),還(hai)沒(mei)有(you)建立人(ren)的(de)細(xi)胞(bao)株(zhu)的(de)事例(li),在研(yan)究設施(shi)中,冷凍的(de)確立(li)細(xi)胞(bao)株(zhu)在需要時被(bei)解(jie)凍,培(pei)養和增殖,並用(yong)於(yu)研(yan)究。
細(xi)胞(bao)株(zhu)應(ying)用(yong)主要體(ti)現在以下幾個(ge)方面(mian):
1)免(mian)疫酶染色各種細(xi)胞(bao)內成份的(de)定(ding)位
2)研(yan)究抗酶抗體(ti)的(de)合(he)成(cheng)
3)顯(xian)現微量(liang)的(de)免(mian)疫沈(chen)澱反應(ying)
4)定(ding)量檢(jian)測(ce)體(ti)液(ye)中(zhong)抗(kang)原(yuan)或(huo)抗體(ti)成(cheng)份(fen)
細(xi)胞(bao)株(zhu)的(de)實驗(yan)標(biao)本采(cai)集(ji):
(1)標(biao)本采(cai)集(ji)後盡(jin)早(zao)進(jin)行(xing)提(ti)取,提取按相(xiang)關(guan)文(wen)獻進(jin)行(xing),提(ti)取後應(ying)盡(jin)快進(jin)行(xing)實驗(yan),若(ruo)不能馬(ma)上(shang)進(jin)行(xing)試驗(yan),可(ke)將(jiang)標(biao)本放(fang)於-20℃保存(cun),但(dan)應(ying)避免(mian)反復凍融。
(2)血(xue)清(qing):使用(yong)不含(han)熱原(yuan)的(de)試管(guan),操(cao)作過程中避免(mian)任(ren)何(he)細(xi)胞(bao)刺(ci)激,收集(ji)血(xue)液(ye)後,3000轉(zhuan)離(li)心10分鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清(qing)和紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速小心(xin)地分離。
(3)血(xue)漿:3000轉離心30分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
(4)細(xi)胞(bao)上(shang)清(qing)液:3000轉(zhuan)離(li)心(xin)10分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒和(he)聚合(he)物(wu)。
(5)組(zu)織(zhi)勻漿:將(jiang)組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)搗碎(sui),3000轉離(li)心10分鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
(6)保存(cun):如(ru)果樣(yang)本(ben)收集(ji)後不及(ji)時檢(jian)測(ce),請(qing)按(an)壹(yi)次(ci)用(yong)量分裝,凍存(cun)於(yu)-20℃,避免(mian)反復凍融,在室(shi)溫下解(jie)凍並(bing)確(que)保樣(yang)品均勻地充分解凍。