細(xi)胞(bao)株通(tong)過選擇法(fa)或克(ke)隆形(xing)成(cheng)法(fa)從原代培(pei)養物或細(xi)胞(bao)系中獲得(de)具有特殊(shu)性質或標(biao)誌(zhi)物的(de)培養物稱(cheng)為細(xi)胞(bao)株，是(shi)用(yong)單細(xi)胞(bao)分離培養或通(tong)過篩選的方(fang)法(fa)，由(you)單細(xi)胞(bao)增(zeng)殖(zhi)形(xing)成(cheng)的細胞(bao)群。細胞(bao)株的特殊(shu)性質或標(biao)誌(zhi)必(bi)須(xu)在整個(ge)培養期間始終(zhong)存(cun)在。特殊(shu)性質或標(biao)誌(zhi)必(bi)須(xu)在整個(ge)培養期間始終(zhong)存(cun)在。對於人類(lei)腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞(bao)，在體外(wai)培養半年(nian)以上，生長(chang)穩定(ding)，並(bing)連(lian)續傳代的(de)即(ji)可稱(cheng)為連(lian)續性株或系(xi)。細胞(bao)株的建(jian)立(li)實驗是(shi)通(tong)過細胞(bao)與低劑(ji)量的藥(yao)物長(chang)期接觸，引(yin)起(qi)細胞(bao)本身生物化(hua)學過程的(de)改(gai)變(bian)，細(xi)胞(bao)膜上出(chu)現(xian)Pgp(或P-170)糖蛋(dan)白(bai)，使細(xi)胞(bao)逐漸對藥(yao)物耐(nai)受。
細(xi)胞(bao)株的培(pei)養小技(ji)巧(qiao)：
1. 買細(xi)胞(bao)要去靠(kao)譜的(de)地(di)方(fang)買，比(bi)如 ATCC 或者(zhe)然泰(tai)生物。壹般上面(mian)會有針對細胞(bao)的介紹(shao)，這樣培(pei)養之(zhi)前(qian)可以(yi)了解細(xi)胞(bao)正常(chang)生長(chang)的狀態(tai)圖(tu)、傳代、培(pei)養基的類(lei)型(xing)等(deng)。
2. 不(bu)管(guan)是(shi)買的(de)細胞(bao)，還是(shi)別人惠贈(zeng)的(de)細胞(bao)，剛拿到(dao)手(shou)趕緊(jin)的(de)做兩件(jian)事：檢測是(shi)否有支(zhi)原體(ti)汙(wu)染;迅(xun)速(su)擴增(zeng)凍存(cun)，凍存(cun)細胞(bao)復蘇(su)後(hou)更換壹次(ci)培養基。
3. 發現(xian)細胞(bao)有汙染迅(xun)速(su)處理(li)掉，特別(bie)是(shi)當妳(ni)養了很多種細胞(bao)時。細菌(jun)汙染、真(zhen)菌(jun)汙染很容(rong)易發現(xian)，支(zhi)原體(ti)汙(wu)染的話，細胞(bao)會長(chang)的慢(man)，可以(yi)買個(ge)支(zhi)原體(ti)檢(jian)測的(de)試(shi)劑盒(he)定(ding)期檢(jian)測壹下(xia)。
4. 不同(tong)細胞(bao)生長(chang)周期(qi)不(bu)同。有的生長(chang)很快(kuai)，比(bi)如說(shuo) MDA-MB-231，傳代的(de)時(shi)候(hou)取(qu)離(li)心(xin)懸(xuan)液(ye)的(de)十(shi)分之(zhi)壹就已經足(zu)夠(gou)了(le)。有的又是(shi)特別(bie)慢(man)，比如 BT474，傳代是(shi)壹分二，復蘇(su)起(qi)始的(de)時(shi)候(hou)兩周多才(cai)能長(chang)滿。這就(jiu)需(xu)要要(yao)在培(pei)養細胞(bao)的過程中(zhong)多多摸(mo)索(suo)。
5. 對於嬌(jiao)弱的細胞(bao)，就得(de)細心(xin)呵護(hu)。胰(yi)酶(mei)消化(hua)不(bu)能過久，吹(chui)得(de)時候(hou)要(yao)輕柔，離(li)心(xin)時候(hou)也(ye)要(yao)註意轉速(su)和時(shi)間。每天(tian)都(dou)要去看壹下(xia)細胞(bao)，肉眼(yan)觀(guan)察培養基狀況(kuang)、顯微鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)生長(chang)狀況(kuang)。
歡(huan)迎來到(dao)