ELISA試(shi)劑(ji)盒的樣品(pin)收集(ji)、處(chu)理(li)及保存方(fang)法(fa):
1、血清-----操(cao)作(zuo)過(guo)程中(zhong)避免任何(he)細(xi)胞刺激(ji)。使用不(bu)含(han)熱原(yuan)和(he)內毒(du)素(su)的試管。收集(ji)血液(ye)後,1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘將(jiang)血清和(he)紅細(xi)胞迅(xun)速(su)小(xiao)心(xin)地分(fen)離。
2、血漿(jiang)-----EDTA、檸檬酸(suan)鹽、肝素(su)血漿(jiang)可用於(yu)檢測。1000×g離(li)心(xin)30分(fen)鐘去除(chu)顆粒(li)。
3、細(xi)胞上清液(ye)---1000×g離心(xin)10分(fen)鐘去除(chu)顆粒(li)和(he)聚(ju)合(he)物(wu)。
4、組(zu)織勻(yun)漿(jiang)-----將組(zu)織加入適量生(sheng)理(li)鹽水搗(dao)碎。1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘,取(qu)上清液(ye)
5、保存------如(ru)果(guo)樣品(pin)不(bu)立即(ji)使用,應將(jiang)其(qi)分(fen)成小(xiao)部分(fen)-70℃保存,避免反(fan)復冷凍。盡可能(neng)的不(bu)要使用溶血或高(gao)血脂血。如果(guo)血清中(zhong)大量(liang)顆粒,檢測前先離心(xin)或過(guo)濾。不(bu)要在(zai)37℃或更(geng)高的溫度加熱解(jie)凍。應在(zai)室(shi)溫下解(jie)凍並(bing)確保樣品(pin)均(jun)勻(yun)地充(chong)分(fen)解(jie)凍。
ELISA試(shi)劑盒的操作(zuo)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang):
1.試劑(ji)應按(an)標(biao)簽說(shuo)明書儲存,使用前恢(hui)復到(dao)室溫。稀(xi)稀過(guo)後的標(biao)準(zhun)品應丟棄,不(bu)可保存。
2.實(shi)驗中(zhong)不(bu)用的板(ban)條應立(li)即放(fang)回(hui)包裝(zhuang)袋中,密封保存,以(yi)免變(bian)質(zhi)。
3.不(bu)用的其(qi)它試劑(ji)應包裝(zhuang)好(hao)或蓋(gai)好(hao)。不(bu)同批(pi)號的試劑不(bu)要混(hun)用。保質前使用。
4.使用壹次(ci)性的吸頭以免交(jiao)叉汙(wu)染,吸(xi)取(qu)終(zhong)止液(ye)和(he)底物(wu)A、B液(ye)時,避免使用帶(dai)金(jin)屬(shu)部分(fen)的加樣器(qi)。
5.使用幹(gan)凈(jing)的塑(su)料容(rong)器(qi)配(pei)置(zhi)洗(xi)滌(di)液(ye)。使用前充(chong)分(fen)混勻(yun)試(shi)劑盒裏的各種成份及(ji)樣品(pin)。
6.洗滌(di)酶(mei)標(biao)板(ban)時應充(chong)分(fen)拍幹(gan),不(bu)要將(jiang)吸水(shui)紙直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)酶(mei)標(biao)反(fan)應孔(kong)中吸水。
7.底物(wu)A應揮(hui)發,避免長(chang)時間打(da)開(kai)蓋(gai)子。底物B對光敏感(gan),避免長(chang)時間暴(bao)露於(yu)光下。避免用手(shou)接(jie)觸,有毒(du)。實(shi)驗完成後應立(li)即讀(du)取(qu)OD值(zhi)。
8.加入試劑的順序應壹(yi)致(zhi),以(yi)保證所(suo)有反(fan)應板(ban)孔(kong)溫育的時間壹(yi)樣。
9.按(an)照說(shuo)明書中(zhong)標(biao)明的時間、加液(ye)的量及順序(xu)進(jin)行(xing)溫(wen)育操(cao)作(zuo)。